The influence of glycerol upon L. reuteri activity against enteropathogens / A influência do glicerol sobre a atividade de L. Reuteri contra enteropatógenos

BACKGROUND: Probiotics containing L. reuteri are popular for treating and preventing bacterial gastrointestinal infections. L. reuteri, produces reuterin, an antibiotic that inhibits gram-negative bacteria. Reuterin production is the result of glycerol fermentation by L reuteri. Although L. reuteri is normally present in the gastrointestinal system, only small amounts of glycerol are usually available; therefore, the production of reuterin may not occur and this could reduce the effectiveness of the probiotic supplement. Our objective is to identify the minimum concentrations of glycerol required for L. reuteri to exert an inhibitory effect on enteropathogenic enterobacteriaceae. METHOD: Samples containing 10(8) colony forming units (CFU) of L. reuteri DSM17938 (Colikids®, Ache, Brazil/BioGaia, Sweden) were grown with varying concentrations of glycerol (0.05-5%). 10(6) CFU of E.coli (CDC0126/INCQS/FIOCRUZ), Shigella flexneri (ATCC/120022), S. enterica (ATCC6539) and Y. enterocolitica (ATCC9610) were inoculated with L. reuteri in the different glycerol concentrations. Each enterobacteria and glycerol 5% without L. reuteri cultures were used as positive control groups. RESULTS: All bacteria were completely inhibited at higher ranges of glycerol concentrations (0.2-5%) and grew at lower concentrations (0.05-0.1%). CONCLUSION: L. reuteri requires at least 0.2% of glycerol to completely inhibit enterobacterial growth. These preliminary findings may influence the current method of use of probiotic supplements. The antibiotic activity of L. reuteri may have potential clinical use against important enteropathogens.

CONTEXTO: Os probióticos que contêm L. reuteri são populares para tratar e prevenir infecções bacterianas do trato gastrointestinal. L. reuteri produz reuterina, um antibiótico que inibe bactérias gram-negativas. A produção de reuterina depende da presença de quantidades adequadas de glicerol, cuja fermentação resulta na produção do antibiótico. Embora L. reuteri esteja normalmente presente no sistema GI, apenas pequenas quantidades de glicerol estão geralmente disponíveis; portanto, a produção de reuterina pode não ocorrer o que poderia reduzir a eficácia do suplemento probiótico. Nosso objetivo é identificar as concentrações mínimas de glicerol necessárias para que L. reuteri exerça um efeito inibitório nas enterobacteriaceas enteropatogênicas. MÉTODO: 108 CFU de L. reuteri DSM17938 (Colikids®, Ache, Brasil / BioGaia, Suécia) cresceu com concentrações variáveis de glicerol (0,05-5%). Foram inoculadas 106 UFC de E. coli (CDC0126 / INCQS / FIOCRUZ), Shigella flexneri (ATCC / 120022), S. enterica (ATCC6539) e Y. enterocolitica (ATCC9610) com L. reuteri nas diferentes concentrações de glicerol. Cada enterobacteria e glicerol 5% sem culturas de L. reuteri foram utilizadas como grupos de controle positivo. RESULTADOS: Todas as bactérias foram completamente inibidas em maiores concentrações de glicerol (0.2-5%) e cresceram em concentrações mais baixas (0.05-0.1%). CONCLUSÃO: L. reuteri requer pelo menos 0,2% de glicerol para inibir completamente o crescimento de enterobacteria. Essas descobertas preliminares podem influenciar o método atual de uso de suplementos de probióticos. A atividade antibiótica de L. reuteri pode ter potencial uso clínico contra importantes enteropatógenos.

Microalgae population dynamics in photobioreactors with secondary sewage effluent as culture medium

Nitrogen and phosphorus present in sewage can be used for microalgae growth, possibiliting cost reduction in the production of microalgae at the same time that it decreases the eutrophication potential of the effluent. This research aimed at monitoring the native community of microalgae and coliform bacteria in a secondary effluent from anaerobic municipal sewage treatment. Two treatments (aerated and non-aerated) were performed to grow microalgae under semi-controlled conditions in semi-closed photobioreactors in a greenhouse. The results showed no significant pH and coliforms (total and Escherichia coli) variation between treatments. Nutrient concentrations were reduced supporting microalgae growth up to 107 cells.mL−1 independent of aeration. Exponential growth was obtained from the first day for the non-aerated, but a 5 day lag phase of growth was obtained for the aerated. Chlorella vulgaris was the dominant microalgae (99.9%) in both treatments. In the aerated, 5 algae classes were detected (Chlorophyceae, Cyanophyceae, Chrysophyceae, Bacillariophyceae and Euglenophyceae), with 12 taxa, whereas in the non-aerated, 2 classes were identified (Chlorophyceae and Cyanophyceae), with 5 taxa. We concluded that effluent is viable for microalgae growth, especially Chlorella vulgaris, at the same time that the eutrophication potential and coliforms are decreased, contributing for better quality of the final effluent.

Bacterial populations in complementary foods and drinking-water in households with children aged 10-15 months in Zanzibar, Tanzania.

Bacteria were quantified in samples of drinking-water and in two porridges prepared for infant-feeding [fortified instant soy-rice porridge (SRP) and cooked porridge (Lishe bora, LB)] in 54 households. Bacterial numbers were measured again after the porridges had been held at room temperature for four hours (T4). Findings were benchmarked against bacterial numbers in traditional complementary foods sampled from 120 households. Total bacteria, coliform, and Enterobacteriaceae counts were enumerated using Petrifilm. The mean log bacterial numbers were the lowest for LB at TO (2.24 +/- 0.84 cfu/g aerobic counts) and the highest for SRP at T4 (4.63 +/- 0.56 cfu/g aerobic counts). The total bacteria, coliform and Enterobacteriaceae counts were higher at T4 than at T0 for LB (p < or = 0.001); however, only the coliform and Enterobacteriaceae counts were higher at T4 than at T0 for SRP (p<0.001). Drinking-water, SRP0, traditional foods, and SRP4 all had the mean aerobic counts higher than the acceptable cut-off but the total bacterial count in SRP0 was not significantly (p=0.543) different from drinking-water. However, coliform and Enterobacteriaceae counts in SRPO were higher than in drinking-water (p<0.001). Also, although the aerobic counts of SRP4 were not significantly (p>0.999) different from traditional foods, the coliform and Enterobacteriaceae counts were significantly higher in SRP4 than in traditional foods (p<0.001). It is, therefore, recommended that food safety concerns be addressed when improving complementary foods.

Evaluación de medio semisólido para la conservación de microorganismos de la familia Enterobacteriaceae

Se estudiaron 26 cepas bacterianas pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, con el objetivo de evaluar el mantenimiento de las propiedades culturales, tintoriales y bioquímicas de microorganismos originalmente preservados en el medio semisólido de conservación, desde finales de la década de los años 80; de las cuales 22 se encontraban viables, lo que demuestra supervivencia por más de 10 años. Los microorganismos han sido mantenidos en este medio desde su introducción al Laboratorio de Colección de Cultivos Microbianos del Instituto Nacional de Higiene, Epidemiología y Microbiología de Cuba; los cuales son utilizados como cepas tipo en el control interno de la calidad de los reactivos y medios de cultivo que se producen en este centro, para su posterior empleo en la evaluación microbiológica de muestras ambientales. Este medio brinda buenos resultados para la conservación de cepas de Enterobacteriaceae y puede ser utilizado en laboratorios con limitados recursos.

26 bacterial strains from the Enterobacteriaceae family were studied to evaluate the maintenance of the cultural, tinctorial and biochemical properties of the microorganisms originally preserved in the semisolid medium of conservation since the end of the 1980's. 22 of them were viable, showing their survival for more than 10 years. The microorganisms have been maintained in this medium since their introduction into the Laboratory of Collection of Microbial Cultures of the National Institue of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba. They have been used as pattern strains in the internal control of the quality of reagents and culture media produced in this center for their further use in the microbiological evaluation of environmental samples. This medium gives good results for the conservartion of strains of Enterobaceriaceae and may be used in laboratories with scarce resources.

Bacteriological quality of holywater from Thai temples in Songkhla Province, southern Thailand.

Seventy-six holy water samples were collected from seventy-six Thai Buddhist temples in Songkhla Province, southern Thailand. The samples were examined for total heterotrophic aerobic bacterial count and total coliform count. The range of total heterotrophic aerobic bacterial count was 6.5 x 10(1)-1.6 x 10(5) CFU/ml, while the total coliform count was < 2- > 1,600 MPN/100 ml. Escherichia coli was isolated from positive coliform tests in a total of 22 samples (28.95 per cent). According to the World Health Organization's (WHO) standards for drinking water (1993), only 9 of the samples (11.84 per cent) qualified. Interestingly, these 9 samples had originated from rain water.

Teste do hidrogênio (H2) no ar expirado do diagnóstico do supercrescimento bacteriano do intestino delgado / Hydrogen test (H2) in the air expired for the diagnosis of small bowel bacterial overgrowth

A sídrome do supercrescimento bacteriano do intestino delgado caracteriza-se pela presença de microorganismos pertencentes à flora colônica no intestino delgado, podendo acarretar ao paciente má absorçao e/ou diarréia e/ou perda de peso. O teste diagnóstico comprovadamente eficaz é a cultura com contagem de colônias do aspirado do intestino delgado, que é um método invasivo e exige meios de cultura específicos e de alto custo, principalmente para bactérias anaeróbias. A flora colônica metaboliza os carboidratos presentes na luz intestinal, liberando hidrogênio (H2) que é absorvido e eliminado pelos pulmoes na expiraçao, nao havendo produçao endógena. Portanto, o teste do H2 no ar expirado após sobrecarga oral de carboidratos é um método alternativo, nao invasivo e específico no diagnóstico de síndrome do supercrescimento bacteriano no intestino delgado.

Gastric bacterial overgrowth accompanies profound acid suppression.

BACKGROUND: Suppression of gastric acid may lead to gastric colonization by aerobic and anaerobic bacteria, and consequent clinical manifestations. The risk is likely to be higher with poor environmental hygiene. AIMS: To study the effect of short-term acid suppression with omeprazole on gastric bacterial flora. METHODS: Twenty-five ambulatory patients with acid-peptic diseases underwent clinical assessment and gastric juice collection (for pH and culture) prior to start of therapy with 20 mg omeprazole daily, on days 7 and 14 of therapy, and 7 days after omission of therapy (day 21). RESULTS: Eighteen patients completed the study. The median gastric pH was 1.8, 7.5, 7.5 and 3.4 on days 0, 7, 14 and 21 respectively. Positive gastric cultures were obtained in 13 of 25, 17 of 21, 18 of 18 and 14 of 18 patients on respective study days, with median colony counts of 1.5 x 10(4), 7.5 x 10(5), 8.7 x 10(7) and 7.3 x 10(4) cfu/mL respectively. Three patients developed self-limiting diarrhea during therapy and two more immediately after discontinuing therapy. CONCLUSIONS: Gastric colonization is common with short-term profound acid-suppression, and may cause diarrhea. Acid suppressive therapy should be used with caution especially in patients with poor environmental hygiene.

Pollution and sanitary quality of river Narmada in relation to human use at Mandla.

Study of physico-chemical characteristics and indicator bacterial population of Narmada river water at six different sites during summer, revealed extremely poor microbiological sanitary quality for human use. Free CO2 was found to be absent from all the sampling sites studied which indicates the trophogenic activity in the river water at Mandla. BOD value ranged from 1.0 to 2.5 mgl-1 and were less than the permissible limits of BOD in fresh waters i.e. 3-6 mgl-1.

Salmonella e escherichia coli em sucos de frutas e outros substratos ácidos: uma revisäo sobre injúria bacteriana / Salmonella and escherichia coli in fruit juices and other acid substrates: a review on bacterial injury

Apesar do efeito limitante do pH de sucos de frutas e outros substratos ácidos, constatou-se a presença de Salmonella e Escherichia coli nesse tipo de alimento, com envolvimento da primeira em surtos toxinfecciosos. Os microorganismos injuriados pelas condiçöes ácidas, ou por outras, de caráter adversas, apresentam lesöes a nível celular que os diferenciam das células normais. Nesta revisäo, o fenômeno da injúria será conceituado e caracterizado. Metodologias adequadas de reparo, evolvendo condiçöes especiais de cultivo e maiores requerimentos nutricionais seräo mostrados, evidenciando-se os reflexos práticos da injúria celular na microbiologia de alimentos e possível comprometimento da saúde pública.

Favorece la Giardia lamblia la proliferación intestinal de bacterias? / Does giardia lamblia favor intestinal bacterial proliferation?

Con el propósito de estudiar si la G. lamblia se acompaña en el intestino de una gran población de bacterias productoras de indol, se investigó la concentración de sulfato de indoxil en la orina, antes y después de erradicar este parásito. Los resultados plantean, indirectamente, que la giardiasis se asocia a una proliferación de enterobacterias que sobrepasa en magnitud la que ordinariamente existe en el intestino

Estudo da colonizaçäo por enterobactérias da porçäo terminal do tubo digestivo de recém-nascidos

Este trabalho teve como objetivo conhecer a colonizaçäo, por enterobactérias, que se desenvolveu no tubo digestivo terminal de recém-nascidos, em um hospital público. Foram coletadas 150 amostras de fezes por "swab" retal, uma de cada criança, as quais tinham idades diferentes, em horas de vida, de zero a 96 horas, e foram analisados os resultados de 142. Além do crescimento bacteriano, consideraram-se variáveis: idade, sexo, tipo de parto, peso de nascimento, local de alojamento no hospital e tipo de aleitamento. Crescimento bacteriano desenvolveu-se em 96 e näo se desenvolveu em 46, dessas amostras. Nenhuma criança mais jovem do que 12 horas de vida mostrou colonizaçäo na coprocultura, pelos métodos empregados. A porcentagem de crianças colonizadas aumentou com o aumento das idades. Nos 142 recém-nascidos, desenvolveram-se 12 variedades bacterianas num total de 158 crescimentos bacterianos isolados ou associados de 2 a 4 variedades. Predominou a Escherichia coli, encontrada em 46,9% dos recém-nascidos colonizados. Seguem-se Enterobacter sp (28,1%), bacilo Gram-negativo näo fermentador (27,1%) e Klebsiella sp (25,0%). Ocorreu a colonizaçäo com germes patogênicos em 5 recém-nascidos (3,3% das 150 crianças). A aplicaçäo do teste de qui quadrado, com nível de significância x <-5+, mostrou dependência do crescimento bacteriano e tempo de vida, principalmente; também, do crescimento bacteriano e tipo de parto (consideradas as idades menores que 48 horas), e local de alojamento e tipo de aleitamento; houve independência entre crescimento bacteriano e sexo e peso de nascimento.

Flora residente intestinal: funciones fisiológicas y alteraciones / Resident intestinal flora: physiological functions and changes

Después del nacimiento el lumen intestinal es colonizado rápidamente, el canal vaginal materno y el medio ambiente proveen las primeras poblaciones microbianas, que ingresan por vía oral y proliferan en los nichos ecológicos que se originan por interacción entre la mucosa intestinal y dichas poblaciones. En esófago, estómago y los tramos altos del intestino, la flora microbiana es escasa con predominio de los aerobios, luego en yeyuno e íleon las poblaciones son mayores, con la presencia de anaerobios, los que luego en los segmentos distales constituyen la mayor parte de la flora comensal del intestino. El control de la flora residente en el período neonatal está fuertemente influenciado por la lactancia materna, luego de esta etapa la dieta pasa a jugar un rol secundaio y el control de la flora es ejercido fundamentalmente por factores no específicos tales como la acidez gástrica, el peristaltismo intestinal, la presencia de mucus y glicoproteínas y factores inmunológicos específicos, presencia de IgA secretoria y células inmunocompetentes (Placas de Peyer, linfocitos, células M, etc.). Como resultado de este conjunto de mecanismos de control el intestino es colonizado por la denominada flora "normal", que es a su vez uno de los medios más relevantes de control en la colonización por patógenos. El estudio de los roles fisiológicos de la flora ha demostrado que esta se asocia a cambios morfológicos y funcionales del intestino. El metabolismo bacteriano repercute en algunas actividades metabólicas del ser humano, deconjugando hormonas sexuales, activando fármacos o desdoblando metabolitos inactivos. En ocasiones la flora lleva a situaciones no deseadas tales como deconjugación de sales biliares y esteatorrea, activación de carcinógeno, sustracción de la vitamina B12, etc. Las alteraciones de la naturaleza y número de poblaciones asociadas a la flora normal pueden desencadenar trastornos tales como el spruetropical o el síndrome de intestino contaminado, característico de sobrepoblación de bacterias en segmentos altos del intestino, diarrea y cuadros de mala absorción